无论是开题还是中期考核还是答辩还是工作汇报,可能会有老师质疑你的条带,说:你这一看就不是一张膜跑的,条带形状不一致。[鄙视R]
咋说呢,是有一些概率不一致的![笑哭R]凡事不是绝对的。
每个蛋白含量不一样,所以一样的上样量但是蛋白丰度不一样,跑出来条带可能也有一些差距,可能有的条带就会挤到,而丰度低的就不会挤到,并且抗体的好用程度也会影响一些。[吧唧R]
[黄金薯R]这时候最好的解决办法是:
1、尽可能让他一致,那就尽可能用1.5的胶,不要用1.0的胶,可以减少这种概率。
2、一张膜蛋白位置有差距的话就一张膜敷,今天敷这个明天同一张膜敷那个,我老这么干,效果也还可以。(前提条件是抗体要好用)把GAPDH调齐以后,先敷目的蛋白条带在敷GAPDH。
3、内参➕标签抗体可以一起敷,图上是GAPDH➕Flag一起敷的,说不一致就把膜给他甩出来告诉他:我这是一张膜。[微笑R]

